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BrdU Incorporation and Labeling of Nascent DNA to Investigate Archaeal Replication Using Super-Resolution Imaging

Résultats de recherche: Le chapitre dans un livre, un rapport, une anthologie ou une collectionChapitreRevue par des pairs

Résumé

The labeling and specific detection of nascent DNA by the incorporation of thymidine analogs provide crucial information about DNA replication dynamics without requiring the intracellular expression of fluorescent proteins. After cell fixation and permeabilization, specific detection of thymidine analogs by antibodies can be performed using super-resolution imaging techniques. Here we describe a protocol to label nascent DNA using 5′-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU) in Haloferax volcanii cells and generate super-resolved images of neo-synthesized DNA foci either by 3D Structured illumination microscopy (3D-SIM) or Stochastic Optical Reconstruction Microscopy (STORM).

langue originaleAnglais
titreMethods in Molecular Biology
EditeurHumana Press Inc.
Pages419-434
Nombre de pages16
Les DOIs
étatPublié - 1 janv. 2022

Série de publications

NomMethods in Molecular Biology
Volume2522
ISSN (imprimé)1064-3745
ISSN (Electronique)1940-6029

Empreinte digitale

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